Diagnóstico molecular

Diagnóstico molecular es una familia de técnicas para el análisis de biomarcadores en el genoma y proteoma, y ​​cómo sus células expresan sus genes como proteínas, aplicando biología molecular a las pruebas médicas. En medicina, la tecnología se utiliza para diagnosticar y monitorear la enfermedad, detectar riesgos y y Decide qué terapia es más efectiva para un paciente individual, introducción en la bioseguridad agrícola, similar a monitorear la enfermedad de los cultivos y el ganado, estimar el riesgo y decidir qué medidas de aislamiento deben tomarse.Al analizar los detalles de un paciente y su enfermedad, los diagnósticos moleculares ofrecen la promesa de medicina personalizada. Estas pruebas son útiles en una variedad de especialidades médicas, incluidas enfermedades infecciosas, oncología, tipificación de antígeno de leucocitos humanos (para estudiar y predecir la función inmune), Coagulación y farmacogenómica La predicción genética de la cual los medicamentos serán más efectivos.: V -VII se superponen con la química clínica (pruebas de medicina humoral).

Técnicas

Desarrollo de herramientas de investigación

La industrialización de los ensayos de biología molecular ha hecho su uso en la clínica práctica. La miniaturización en un solo dispositivo portátil puede llevar el diagnóstico médico a la clínica, consultorio o hogar. Los laboratorios clínicos de entrada requieren altos estándares de confiabilidad; El diagnóstico puede requerir certificación o estar sujeto a las regulaciones de dispositivos médicos. En 2011, algunos laboratorios clínicos de EE. UU. Todavía usan kits de prueba vendidos para "Uso de investigación solamente". Los procesos de laboratorio deben cumplir con regulaciones como las enmiendas de mejora del laboratorio clínico, la Ley de Portabilidad y Responsabilidad del Seguro de Salud, buenas prácticas de laboratorio y regulaciones de administración de alimentos y medicamentos en los Estados Unidos. Los sistemas de gestión de información de información ayudan a realizar un seguimiento de estos procesos. Las regulaciones se aplican a los empleados y suministros. A partir de 2012, 12 estados de EE. UU. Requieren que los patólogos moleculares tengan licencia; Varias juntas, incluida la Junta Americana de Genética Médica y la Junta Americana de Patología, certifican técnicos, supervisores y directores de laboratorio.

La automatización y la muestra de codificación de barras maximizan el rendimiento y reducen el potencial de error o contaminación durante el manejo manual e informes de resultados. Ahora es posible un solo dispositivo que realiza una inspección de principio a fin.

Ensayos

Diagnósticos moleculares Utilice bioensayos in vitro como PCR-Elisa o hibridación in situ de fluorescencia in situ. El ensayo detecta una molécula (generalmente en baja concentración) que es un marcador de enfermedad o riesgo en una muestra tomada de un paciente. crítico. El manejo manual debe minimizarse. Las moléculas de ARNFrágiles de ARN presentan ciertos desafíos. Proporciona una medida de la expresión génica como parte del proceso celular de expresión de genes como proteínas, pero se hidroliza y se descompone fácilmente por las enzimas RNasa siempre presentes. Las muestras pueden congelarse en nitrógeno líquido o incubar en conservantes.Debido a que los métodos de diagnóstico molecular pueden detectar marcadores sensibles, estas pruebas son menos invasivas que las biopsias tradicionales. Por ejemplo, una muestra de sangre simple es suficiente para extraer información genética de tumores, trasplantes o fetos no nacidos debido a la presencia de ácidos nucleicos libres de células en humanos Plasma.CH 45 Muchos (pero no todos) métodos de diagnóstico molecular se basan en la detección de ácido nucleico utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para aumentar en gran medida el número de moléculas de ácido nucleico, amplificando así la secuencia objetivo en una muestra de paciente. Introducción La PCR es un método de amplificación utilizando ADN de plantilla para sintetizar cebadores, ADN polimerasa y DNTP. La mezcla se ciclista entre al menos 2 temperaturas: una temperatura alta para desnaturalizar el ADN de doble cadena en moléculas monocatenarias y una temperatura baja para los cebadores para cebadores a hibridarse a la plantilla y una polimerasa para extender los cebadores. Cada ciclo de temperatura duplica teóricamente el número de secuencias objetivo. La detección de las variaciones de secuencia utilizando PCR típicamente implica el diseño y el uso de reactivos de oligonucleótidos amplifica la variante de interés de manera más eficiente que el de tipo salvaje secuence.pcr es actualmente el método más utilizado de detección de secuencia de ADN. La detección de marcadores puede usar PCR en tiempo real, secuenciación directa: CH 17 Microarray-Chip prefabricado que prueba muchos marcadores a la vez, CH 24 o Maldi-TOF. El mismo El principio se aplica en el proteoma y el genoma. Las matrices de proteínas de alto rendimiento pueden usar la conjugación complementaria de ADN o anticuerpo, por lo que se pueden detectar muchas proteínas diferentes en paralelo. Aplicado en los laboratorios donde se usan. Por lo tanto, se requiere la validación local robusta y el uso de controles apropiados de acuerdo con los requisitos reglamentarios, especialmente si los resultados pueden usarse para informar las decisiones de tratamiento del paciente.