Prueba de flujo lateral y una breve historia

El Prueba de flujo lateral (LFT) es un ensayo también conocido como dispositivo de flujo lateral (LFD), ensayo inmunocromatográfico de flujo lateral o prueba rápida. Es un dispositivo simple diseñado para detectar la presencia de sustancias objetivo en muestras de líquido sin la necesidad de equipos especializados y costosos. Las LFT se usan ampliamente para diagnósticos médicos en el hogar, el punto de atención y el laboratorio. Por ejemplo, un hogar, un hogar La prueba de embarazo es un LFT que detecta hormonas específicas. Estas pruebas son simples y asequibles, y generalmente muestran resultados en aproximadamente cinco a treinta minutos. Muchas aplicaciones basadas en el laboratorio aumentan la sensibilidad de las LFT simples mediante el uso de equipos especializados adicionales. Desde que la sustancia objetivo es Por lo general, un antígeno biológico, muchas pruebas de flujo lateral son pruebas rápidas de antígeno (rata o arte).LFT opera con el mismo principio que la cromatografía de afinidad en un ensayo inmunosorbente ligado a enzimas (ELISA). Esencialmente, estas pruebas ejecutan una muestra líquida a lo largo de la superficie de la almohadilla con moléculas reactivas, que muestran un resultado visualmente positivo o negativo. Estas almohadillas se basan en una serie de lechos capilares, como láminas de papel poroso, polímeros microestructurados o polímeros sinterizados. Las almohadillas tienen la capacidad de transportar espontáneamente los líquidos (por ejemplo, orina, sangre, saliva).La almohadilla de muestra actúa como una esponja y contiene un exceso de fluido de muestra. Después de remojo, el líquido fluye a una segunda almohadilla conjugada, donde el fabricante almacena partículas bioactivas liofilizadas llamadas conjugados (ver más abajo) en una matriz de sal de sal. La almohadilla conjugada contiene todos los reactivos necesarios para optimizar la reacción química entre la molécula objetivo (por ejemplo, antígeno) y su socio químico inmovilizado en la superficie de las partículas (por ejemplo, anticuerpo). Esto marca las partículas de interés a medida que pasan a través de la almohadilla y continúan a través de la prueba y Líneas de control. La línea de prueba muestra una señal, generalmente el color en una prueba de embarazo. La línea de control contiene el ligando de afinidad y muestra si la muestra está fluyendo y las biomoléculas en la almohadilla conjugada están activas. Después de pasar a través de estas zonas de reacción, El fluido ingresa al material poroso final, la mecha, que simplemente actúa como un contenedor de desechos.LFT se puede realizar como un ensayo de competencia o sándwich.

Historia

LFT se derivó de la cromatografía en papel, que fue desarrollada por Martin y Synge en 1943 y elaboró ​​por Conden, Gordon y Martin en 1944. Después de 1945, la actividad en este campo explotó. La técnica ELISA se desarrolló en 1971. Beginiendo en 1988, Armkel Llc Llc presentó un grupo de patentes LFT, incluida la demanda descrita debajo de los 6.485.982

Sinopsis

Partículas de color

En principio, se puede usar cualquier partícula de color, pero las partículas de oro de látex (azul) o de tamaño nano (rojo) se usan más comúnmente. Las partículas de Gold aparecen rojas debido a la resonancia de plasmón de superficie localizada. Pero estos requieren el uso de un lector electrónico para evaluar los resultados de las pruebas.

Prueba de sándwich

Los métodos sandwich se usan típicamente para analitos más grandes porque tienden a tener múltiples sitios de unión. A medida que la muestra migra a través del ensayo, primero encuentra un conjugado, un anticuerpo específico para el analito de interés marcado con una etiqueta visual, generalmente oro coloidal. enlace y migra con analitos objetivo en la muestra hasta que llegan a la línea de prueba. La línea de prueba también contiene anticuerpos inmovilizados específicos del analito de interés que se une a las moléculas conjugadas unidas al analito migrante. luego exhibe un cambio visual, lo que confirma la presencia de la molécula objetivo. Los ensayos de sándwich también tienen una línea de control que está presente independientemente de la presencia o ausencia del analito de interés para garantizar una función adecuada de la almohadilla de flujo lateral. Esta rápida, baja, baja, baja. -La prueba basada en el sándwich de cosecha se usa comúnmente en las pruebas de embarazo en el hogar para detectar gonadotropina coriónica humana (HCG) en la orina de las mujeres embarazadas.

Ensayos competitivos

Los ensayos competitivos se usan típicamente para analitos más pequeños porque los analitos más pequeños tienen menos sitios de unión. La muestra primero encuentra anticuerpos dirigidos contra analitos objetivo marcados con etiquetas visuales (partículas de colores). La línea de prueba contiene el analito de interés inmovilizado en la superficie. De interés no está presente en la muestra, los anticuerpos no unidos se unirán a estas moléculas de analitos inmovilizadas, lo que significa que se mostrará un marcador visual. Conversamente, cuando el analito objetivo esté presente en la muestra, se une a los anticuerpos para evitar que se unan al analito inmovilizado en la línea de prueba, por lo que no se muestran marcadores visuales. Esto difiere del análisis de sándwich como la ausencia de una banda significa que el analito está presente.

Pruebas cuantitativas

La mayoría de las LFT están diseñadas para operar de manera puramente cualitativa. Sin embargo, la resistencia de la línea de prueba se puede medir para determinar la cantidad de analito en la muestra. Algunas empresas usan dispositivos de diagnóstico de mano llamados lectores de flujo lateral para proporcionar resultados de ensayo totalmente cuantitativos. Al iluminar con una longitud de onda única de luz combinada con CMOS o tecnología de detección de CCD, se pueden generar imágenes ricas en señal de la línea de prueba real. Uso de algoritmos de procesamiento de imágenes diseñados para tipos y medios específicos de prueba, las intensidades de línea se pueden correlacionar con las concentraciones de analito . Detekt biomedical L.L.C.Manufactures Una plataforma de dispositivos de flujo lateral de mano. El bombeo capilar de fluidos de muestra es otra forma de pasar de resultados cualitativos a cuantitativos. Por ejemplo, el trabajo reciente ha demostrado que el bombeo capilar tiene una velocidad de flujo constante independiente de la viscosidad líquida y la energía superficial.